Дуган, О. М.Тітов, Андрій Вадимович2024-04-192024-04-192021Тітов, А. В. Отримання рекомбінантного білка-аналога рецепторзв’язуючого домена SARS-Cov-2 з використанням білок-експресуючої системи Escherischia coli : магістерська дис. : 162 Біотехнології та біоінженерія / Тітов Андрій Вадимович. – Київ, 2021. – 77 с.https://ela.kpi.ua/handle/123456789/66348Магістерська дисертація містить 77 с., 14 рис., 31 табл., 82 посилання. Пандемія коронавірусної інфекції, спричинена новим збудником SARS- CoV-2, стрімко поширилась на всіх континентах і становить серйозну загрозу для здоров’я людей. В умовах пандемічної ситуації є важливим розробка вітчизняних діагностичних тест- систем призначених для аналізу сироватки або плазми крові на нуклеокапсидний антиген вірусу Sars-CoV-2. Робота виконувалась на базі науково-виробичничої компанії «Діапроф- Мед». Мета роботи - розробка технології виробництва рекомбінантного аналога білка вірусу SARS-Cov-2. Завдання дослідження: 1) детальне ознайомлення з морфолого-фізіологічними та культуральними особливостями продуцентів, методами отримання промислових штамів; 2) дослідження впливу поживного середовища, умов культивування, концентрації хімічного індуктора на вихід високоефективної фракції білку; 3) підбір адекватної математичної моделі для опису кривих росту досліджуваного мікроорганізма; 4) відпрацювання методів очищення цільового продукту; 5) розрахування собівартості впровадження у виробництво ІФА тест- системи на основі отриманого рекомбінантного білку. Запропоновано, в якості продуцента рекомбінантного білку, використовувати штам E. coli Rosetta (DE3) з плазмідою pET28a-GST-RBD. Предмет дослідження: отримання високоефективної фракції рекомбінантного білку GST-RBD. В роботі застосовані хімічні, біологічні, мікробіологічні, імунологічні, статистичні, аналітичні методи дослідження. Наукова новизна одержаних результатів: досліджено оптимальні умови отримання розчинної фракції протеїну, поживне середовище ТВ, температура культивування – 37 оС, концентрація ІПТГ – 0,1 мМ, проведення індукції за оптичної густини – 0,3 о.о та час культивування після індукції – 4 години. Отриманий препарат може бути використаний для створення ІФА тест- систем за для виявлення інфікування SARS-CoV-2, або для перевірки ефективності вакцинування (Індійська вакцина Сovishield спрямована на утворення антитіл до RBD антигенів). Також препарат може бути використаний у складі діагностичної системи як додатковий антиген для збільшення специфічності тестування. За темою дисертації було опубліковано 5 наукових праць, утому числі: 1 наукова стаття та 4 тези на всеукраїнських та міжнародних конференціях.77 с.ukРЕКОМБІНАНТНИЙ БІЛОКSPIKEВІРУС SARS-COV-2ESCHERICHIA COLIROSETTA (DE3)ІПТГЛОГІСТИЧНА ФУНКЦІЯ ФЕРХЮЛЬСТАМЕТОД ІМАХАФІННА ХРОМАТОГРАФІЯАТЗТ НВК ДІАПРОФ МЕД.RECOMBINANT PROTEINSARS-COV-2 VIRUSROSETTA(DE3)IPTGLOGISTIC FUNCTION OF FERHULSTIMAХ METHODAFFINITY CHROMATOGRAPHYATZT NVK DIAPROF MED.Master Thesis579.61