Методи оцінки біологічної активності рекомбінантного інтерлейкіну-7 людини і дослідження стабільності препарату на його основі

Скорочена інформація про документ
dc.contributor.authorЛуценко, Тетяна Миколаївна
dc.contributor.authorСтаросила, Дарина Борисівна
dc.contributor.authorРибалко, Світлана Леонтіївна
dc.contributor.authorГалкін, Олександр Юрійович
dc.contributor.authorLutsenko, T. N.
dc.contributor.authorStarosyla, D. B.
dc.contributor.authorRybalko, S. L.
dc.contributor.authorGalkin, A. Yu.
dc.contributor.authorЛуценко, Т. Н.
dc.contributor.authorСтаросила, Д. Б.
dc.contributor.authorРыбалко, С. Л.
dc.contributor.authorГалкин, А. Ю.
dc.date.accessioned2017-01-16T10:21:23Z
dc.date.available2017-01-16T10:21:23Z
dc.date.issued2016
dc.description.abstractenBackground. Interleukin-7 is one of the most important immune regulatory cytokines. Recombinant human interleukin-7 (rIL-7) in aqueous solution is subjected to chemical degradation mechanisms such as proteolysis, oxidation, disulfide exchange, oligomerisation etc. Such changes affect the shelf life of the preparation on the basis of rIL-7. Evaluation of the biological activity of rIL-7 can be carried out by assessing its antiviral activity. Objective. Comparison of methods for inhibiting reproduction of the influenza virus, herpes simplex virus and hepatitis C virus with recombinant human interleukin-7 and research stability of the preparation on the basis of rIL-7. Methods. We used immortalized cells: the kidneys of dogs, the bovine kidneys and kidneys of African green monkey Vero. The following viruses were used: hepatitis C virus surrogate (bovine viral diarrhea virus, BVDV), influenza virus (strain A/FM/1/47 (H1N1)), herpes simplex virus type 2 (HSV-2) (BH strain). To determine the antiviral activity of rIL-7 in vitro conditions using daily, immortalized cells. Cells were grown in RPMI-1640 medium. Results. It was shown that rIL-7 in buffer stabilizing solutions and the culture medium after 1 week of storage was active at a dilution of 0.003 g/ml against BVDV. The study results of antiviral activity of rIL-7 drug in buffer solutions and culture medium against influenza virus A/FM/H1N1 can conclude that storage of the drug in buffer solution and in the intact state at 4 °C for one week has not affected its antiviral activity. It was shown that antiherpetic activity of preparations after 1 week of storage at 4 °C in buffer stabilizing solutions and intact state remained effective. The antiviral activity of drugs in a stabilizing solution has been persisted for 3 months at 4 °C, and in the intact state of rIL-7 lost its antiviral activity after 1 week against the herpes virus, and after 1 month regarding BVDV. Conclusions. Methods for assessing the antiviral activity of rIL-7 towards BVDV, influenza virus, and HSV-2 were developed. It has been proven that the stabilizing buffer solutions proposed by us provide a high level of biological activity of rIL-7 preparations during storage at 4 °C for 3 months, which is a prerequisite for the development of liquid dosage forms of pharmaceutical preparations on their basis.uk
dc.description.abstractruПроблематика. Интерлейкин-7 является одним из важнейших регуляторных цитокинов иммунной системы. Рекомбинантный интерлейкин-7 человека (рИЛ-7) в водных растворах подвергается механизмам химического разложения, таким как протеолиз, окисление, дисульфидный обмен, олигомеризация и т.д. Подобные изменения влияют на срок годности препарата на основе рИЛ-7. Оценку биологической активности рИЛ-7 можно проводить посредством оценки его противовирусной активности. Цель исследования. Сравнение методов ингибирования репродукции вирусов гриппа, простого герпеса и гепатита С рекомбинантным интерлейкином-7 человека и исследование стабильности препарата на его основе. Методика реализации. В работе использовали перевиваемые культуры клеток: почки собак, почки быка и почки африканской зеленой мартышки Vero. Использовали такие вирусы: суррогатный вирус гепатита С (вирус бычьей вирусной диареи (ВБВД)), вирус гриппа (штамм А/FM/1/47 (H1N1)), вирус простого герпеса 2 типа (ВПГ-2) (штамм ВН). Для определения антивирусной активности рИЛ-7 в условиях in vitro использовали суточную перевиваемую культуру клеток. Клетки выращивали на среде RPMI-1640. Результаты исследования. Показано, что рИЛ-7 в буферных стабилизирующих растворах и культуральной среде через 1 неделю хранения был активным в разведении 0,003 мкг/мл против вируса ВБВД. По результатам исследований антивирусной активности препарата рИЛ-7 в буферных растворах и культуральной среде против вируса гриппа А/FM/H1N1 можно сделать вывод, что хранение препарата в буферных растворах и в интактном состоянии при температуре 4 °С в течение 1 недели не влияло на его антивирусную активность. Показано, что антигерпетическая активность препаратов через 1 неделю хранения при температуре 4 °С в буферных стабилизирующих растворах и интактном состоянии оставалась эффективной. Антивирусная активность препаратов в стабилизирующем растворе сохранялась в течение 3-х месяцев при температуре 4 °С, а в интактном состоянии рИЛ-7 терял свою антивирусную активность через 1 неделю в отношении вируса герпеса и через 1 месяц в отношении ВБВД. Выводы. Разработаны методики оценки противовирусной активности рИЛ-7 по отношению к ВБВД, вирусу гриппа, а также ВПГ-2. Доказано, что предложенные нами буферные стабилизирующие растворы обеспечивают высокий уровень биологической активности препаратов рИЛ-7 при их хранении при температуре 4 °С в течение 3-х месяцев, что является предпосылкой для разработки на их основе жидких лекарственных форм фармацевтических препаратов.uk
dc.description.abstractukПроблематика. Інтерлейкін-7 є одним із найважливіших регуляторних цитокінів імунної системи. Рекомбінантний інтер­лейкін-7 людини (рІЛ-7) у водних розчинах піддається механізмам хімічного розкладання, таким як протеоліз, окиснення, дисульфідний обмін, олігомеризація тощо. Подібні зміни впливають на строк придатності препарату на основі рІЛ-7. Оцінку біологічної активності рІЛ-7 можна проводити через його противірусну активність. Мета дослідження. Порівняння методів інгібіції репродукції вірусів грипу, простого герпесу та гепатиту С рекомбінантним інтерлейкіном-7 людини та дослідження стабільності препарату на його основі. Методика реалізації. У роботі використовували перещеплювані культури клітин: нирки собак, нирки бика та нирки африканської зеленої мавпи Vero. Використовували такі віруси: сурогатний вірус гепатиту С (вірус бичачої вірусної діареї (ВБВД)), вірус грипу (штам А/FM/1/47(H1N1)), вірус простого герпесу 2 типу (ВПГ-2) (штам ВН). Для визначення антивірусної активності рІЛ-7 в умовах in vitro використовували добову перещеплювану культуру клітин. Клітини вирощували на середовищі RPMI-1640. Результати дослідження. Показано, що рІЛ-7 у буферних стабілізуючих розчинах і культуральному середовищі через 1 тиждень зберігання був активним до розведення 0,003 мкг/мл проти вірусу ВБВД. За результатами досліджень антивірусної активності препарату рІЛ-7 у буферних розчинах та культуральному середовищі проти вірусу грипу А/FM/H1N1 можна зробити висновок, що зберігання препарату в буферних розчинах і в інтактному стані за температурі 4 °С протягом 1 тижня не впливало на його антивірусну активність. Показано, що антигерпетична активність препаратів через 1 тиждень зберігання за температури 4 °С у буферних стабілізуючих розчинах та інтактному стані залишалася ефективною. Антивірусна активність препаратів у стабілізуючому розчині зберігалася упродовж 3-х місяців за температури 4 °С, а в інтактному стані рІЛ-7 втрачав свою антивірусну активність через 1 тиждень відносно вірусу герпесу і через 1 місяць відносно ВБВД. Висновки. Розроблено методики оцінки противірусної активності рІЛ-7 відносно ВБВД, вірусу грипу, а також ВПГ-2. Доведено, що запропоновані нами буферні стабілізуючі розчини забезпечують високий рівень біологічної активності препаратів рІЛ-7 при їх зберіганні за температури 4 °С упродовж 3-х місяців, що є передумовою для розробки на їх основі рідких лікарських форм фармацевтичних препаратів.uk
dc.format.pagerangeС. 48-54uk
dc.identifier.citationМетоди оцінки біологічної активності рекомбінантного інтерлейкіну-7 людини і дослідження стабільності препарату на його основі / Луценко Т. М., Старосила Д. Б., Рибалко С. Л., Галкін О. Ю. // Наукові вісті НТУУ «КПІ» : науково-технічний журнал. – 2016. – № 3(107). – С. 48–54. – Бібліогр.: 11 назв.uk
dc.identifier.doihttps://doi.org/10.20535/1810-0546.2016.3.65102
dc.identifier.urihttps://ela.kpi.ua/handle/123456789/18485
dc.language.isoukuk
dc.publisherНТУУ "КПІ"uk
dc.publisher.placeКиївuk
dc.source.nameНаукові вісті НТУУ «КПІ»: науково-технічний журналuk
dc.status.pubpublisheduk
dc.subjectінтерлейкін-7 людини рекомбінантнийuk
dc.subjectпротивірусна активністьuk
dc.subjectбіологічна стандартизаціяuk
dc.subjectinterleukin-7 human recombinanten
dc.subjectantiviral activityen
dc.subjectbiological standardizationen
dc.subjectинтерлейкин-7 человека рекомбинантныйru
dc.subjectпротивовирусная активностьru
dc.subjectбиологическая стандартизацияru
dc.subject.udc615.281.8 + 578.245uk
dc.titleМетоди оцінки біологічної активності рекомбінантного інтерлейкіну-7 людини і дослідження стабільності препарату на його основіuk
dc.title.alternativeMethods of Assessing Biological Activity of Recombinant Human Interleukin-7 and Stability Study of the Preparation on Its Basisuk
dc.title.alternativeМетоды оценки биологической активности рекомбинантного интерлейкина-7 человека и исследование стабильности препарата на его основеuk
dc.typeArticleuk
thesis.degree.level-uk

Файли

Контейнер файлів
Зараз показуємо 1 - 1 з 1
Ескіз
Назва:
9_Lutsenko.pdf.pdf
Розмір:
217.11 KB
Формат:
Adobe Portable Document Format
Завантажити
Ліцензійна угода
Зараз показуємо 1 - 1 з 1
Ескіз недоступний
Назва:
license.txt
Розмір:
7.71 KB
Формат:
Item-specific license agreed upon to submission
Опис:
Завантажити

Зібрання

Наукові вісті НТУУ «КПІ»: науково-технічний журнал, № 3(107)