Оптимізація Agrobacterium-опосередкованої трансформації Nicotiana tabacum
Вантажиться...
Дата
2025
Автори
Науковий керівник
Назва журналу
Номер ISSN
Назва тому
Видавець
КПІ ім. Ігоря Сікорського
Анотація
Дипломна робота містить: 73 сторінки, 28 рисунків, 12 таблиць, 52 літературних джерела. Об’єкт дослідження: Agrobacterium-опосередкована трансформація тютюну (N. tabacum) плазмідним вектором plTest1. Предмет дослідження: вплив середовища для інокуляції A. tumefaciens на ефективність Agrobacterium-опосередкованої трансформації тютюну (N. tabacum). Мета роботи: підібрати оптимальний склад середовища інокуляції A. tumefaciens для забезпечення найвищої ефективності агробактеріальної трансформації тютюну. Методи дослідження: культуральні (культура in vitro), молекулярно біотехнологічні (Agrobacterium-опосередкована трансформація), фізико-хімічні (спектрофотометрія, флюоресцентна детекція білка GFP), гістохімічні (активність B-глюкоронідази), статистичні. Результати роботи: встановлено, що додавання іонів магнію до середовища для інокуляції в концентрації 1000 мг/л, підвищує ефективність генетичної трансформації тютюну та рівень експресії цільових генів (ZsGreen та gusA). За флюоресцентною детекцією GFP та гістохімічним аналізом активності B- глюкоронідази, встановлено, що оптимальним складом середовища для інокуляції A. tumefaciens є 1/2 MS з додаванням MgSO4 (1000 мг/л), для якого ефективність генетичної трансформації тютюну за експресією генів ZsGreen та gusA була найвищою і становила 69,3% та 60% на 28 добу після інкубації. Наукова новизна: вперше встановлено вплив іонів магнію в складі середовища для інокуляції A. tumefaciens на ефективність Agrobacterium опосередкованої трансформації тютюну та встановлено, що оптимальним середовищем, що забезпечує найвищий рівень експресії генів ZsGreen та gusA є 1/2 MS з додаванням MgSO4 (1000 мг/л).
Опис
Ключові слова
nicotiana tabacum, agrobacteriumопосередкована трансформація, оптимізація, середовище для інокуляції, трансгенні рослини, agrobacterium-mediated transformation, optimization, inoculation medium, transgenic plants
Бібліографічний опис
Вернидуб, В. А. Оптимізація Agrobacterium-опосередкованої трансформації Nicotiana tabacum : дипломна робота … бакалавра : 162 Біотехнології та біоінженерія / Вернидуб Вадим Андрійович. — Київ, 2025. — 73 с.